Imunohistoquímica e Patologia Molecular

Biologia molecular, genética, imunologia, histotecnologia

As aulas teóricas visam a apresentação detalhada dos conteúdos programáticos. Nestas utilizar-se-á uma
metodologia expositiva-ativa, apelativa da intervenção direta dos alunos, favorecendo assumidamente uma
iconografia abundante em detrimento do ensino meramente teórico-descritivo.
Na vertente teórico-prática do ensino da unidade curricular privilegiar-se-á, a realização de trabalhos práticos, onde
o aluno possa apresentar uma estratégia de estudo para uma determinada patologia.

Conhecimentos:
Conceitos de biologia molecular aplicados a doenças hereditárias
Patogénese e epidemiologia de doenças comuns e raras
Modos de transmissão: autossómica, ligada ao cromossoma X e de penetrância variável
“Background genético”: fator de risco; moduladores positivos e negativos
Diversas metodologias e sua aplicabilidade
Fundamentos de imunohistoquímica e sua aplicação ao diagnóstico anatomopatológico
Métodos de deteção antigénica e a sua aplicação aos diferentes tipos de material biológico
Aptidões:
Correlacionar severidade clínica com tipos de mutações. Correlação genótipo-fenótipo
Compreender os diferentes métodos imunohistoquímicos, e seleccionar o mais adequado ao material biológico a
estudar
Interpretar os resultados e validar
Competências:
Selecionar a melhor estratégia de estudo para determinado tipo de patologia e análise em “silico”
Delinear protocolos
Selecionar e construir controlos de qualidade adequados à validação das metodologias imunohistoquímicas

 Imunohistoquímica

1. Enquadramento histórico e utilidade da IHQ

2. Anticorpo e antigénio: Imunoglobulinas, estrutura e função

3. Pré-requisitos para IHQ

4. Soros monoclonais e policlonais

5. IHQ básica: Imunofluorescência e imunoenzimologia

6. Métodos imunohistoquímicos

7. Diluição de anticorpos

8. Incubações, tempo, temperatura e pH

9. Enzimologia básica: Cromogénios e substratos

10. Fixação e sua importância na IHQ

11. Recuperação antigénica

12. Marcação inespecífica

13. Controle de qualidade em IHQ

14. Aplicações da IHQ

Patologia molecular

1. Ciclo celular: ciclinas; ciclin dependent kinases (Cdk); atividade catalítica das Cdk; regulação das Cdk. Checkpoints no ciclo celular

2. Vias de sinalização. Regulação

3. Mutações e patologias raras

4. Polimorfismos e suscetibilidade à doença comum poligénica

5. SNP’S – polimorfismos não sinónimos – previsão do efeito de nsSNP’s

6. Anemias congénitas (monogénicas fenótipo simples): talassémias e hemoglobinopatias

7. Fibrose quística (monogénica fenótipo complexo)

8. Insulina e diabetes (tipo 1 e MODY) (multigénica fenótipo complexo)

9. Efeito gene/proteína nos carcinomas:

– KRAS no carcinoma colorectal

– HER2 no carcinoma da mama

– EGFR no carcinoma do pulmão

– BRAF no melanoma

NAO

 Bibliografia primária:

– Azevedo C.; Sunkel Claudio E. (2012). Biologia Celular e Molecular . 5ª Ed. Lidel – edições técnicas.

– Strachan, T., Read, A. P., 2002. Genética Molecular Humana. 2ª Ed. Editora Artmed.

  Bibliografia secundária:

– José Manuel Gonzalez de Baitrago JMMJ. Patologia Molecular.

– True, L. Atlas of diagnostic immunohistopathology – Gower medical publishing, 1990

– Elias, J. Immunohistopathology: a practical approach to diagnosis. 2ª Ed. Nova Iorque: American Society for Clinical Pathology, 2003.

– Hayat, M. Microscopy, Immunohistochemistry, and Antigen Retrieval Methods: For Light and Electron Microscopy. Nova Iorque: Kluwer Academic/Plenum Publishers, 2002.

– Dako. Immunohistochemical staining methods. 5a edição. (Kumar G, Rudbeck L, eds.). Carpinteria: Dako; 2009.

– Polak, J; Noorden, S. Introduction to Immunocytochemistry (3ª Ed.). Londres: BIOS Scientific Publishers, 2003.

– Roitt, I. Essential Immunology. 11ª Ed. Nova Iorque: Blackwell Scientific Publications, 2006.